摘要:
目的 检测微小RNA(miRNA)-148a-3p在寻常型银屑病患者外周血CD4+T淋巴细胞中的表达,探讨其在寻常型银屑病发病中的作用.方法 2017年7月至2018年4月在广州市皮肤病防治所收集寻常型银屑病患者20例,健康对照20例.抽取受试者外周静脉血,采用免疫磁珠法分选CD4+T细胞,实时定量PCR检测外周血CD4+T细胞中miRNA-148a-3p的表达;利用生物信息学软件预测miRNA-148a-3p的潜在靶基因,并通过双萤光素酶报告系统进行验证;采用Western印迹法检测受试者CD4+T细胞中miRNA-148a-3p潜在靶基因Bim蛋白表达水平.采用SPSS 20软件,对于符合正态分布的资料,两个独立样本均数比较采用t检验,对双变量资料计算Pearson相关系数;对不符合正态分布的资料,两样本均数比较采用非参数Mann Whitney U检验,对双变量资料计算Spearman相关系数.结果 寻常型银屑病组18例患者CD4+T细胞中miRNA-148a-3p的表达水平为5.61±1.66,健康对照组12例为1.00±0.26,两组比较,U=12,P< 0.05.银屑病患者miRNA-148a-3p表达量与银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)呈正相关(r=0.93,P<0.001).生物信息学软件预测B淋巴细胞瘤2相互作用的细胞死亡调节因子(Bim)是miRNA-148a的潜在靶基因之一,并通过双萤荧光素酶报告系统得到验证.患者组(11例)CD4+T细胞Bim表达水平为0.69±0.07,健康对照组8例为0.93±0.06,两组比较,t=4.38,P< 0.01.银屑病患者Bim表达量与PASI评分呈负相关(r=-0.774,P<0.01).结论 miRNA-148a-3p在寻常型银屑病患者外周血CD4+T细胞中过度表达,并可能通过调控Bim蛋白的表达,导致CD4+T细胞异常活化,进而参与银屑病的发生、发展.