嗜热芽胞杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶在枯草芽胞杆菌中的表达

• 作者: 张慧 方宇 林陈强 贾宪波 陈济琛 陈龙军
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草杆菌工程菌 α-环糊精葡萄糖基转移酶 表达 优化
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 资源与环境科学
• 页码范围: 600-605
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.014

摘要

[目的]构建分泌表达α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)的重组枯草芽胞杆菌,实现α-CGTase的安全高效表达.[方法]通过PCR法扩增嗜热地芽胞杆菌α-CGTase基因,运用EcoR I/Xho I分别对α-CGTase基因及pBES进行双酶切,然后将该基因片段插入到大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭载体pBES中,再电转化法转化枯草芽胞杆菌RIK1285;对重组枯草芽胞杆菌B.subtilis RIK1285/pBE-CGT发酵条件进行探索.[结果](1)利用发酵培养基分泌表达α-CGTase,重组枯草芽胞杆菌工程菌B.subtilis RIK1285/pBE-CGT发酵上清液产酶达到2.9 U·mL-1.(2)TB为最适发酵培养基(配方:甘油0.5％,蛋白胨1.2％,酵母粉2.4％,K2 HPO41.64％,KH2 PO40.23％);在初始pH 6.5,温度为37℃下,摇瓶发酵培养24 h后,α-环糊精酶的环化活性达到5.3 U·mL-1,是野生菌株嗜热地芽胞杆菌(0.66 U·mL-1)的8倍.[结论]成功构建了枯草芽胞杆菌B.subtilis RIK1285/pBE-CGT工程菌,并确定其最适发酵培养基和培养条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈济琛	福建省农业科学院土壤肥料研究所	88	786	15.0	23.0
2	林陈强	福建省农业科学院土壤肥料研究所	28	232	9.0	14.0
3	张慧	福建省农业科学院土壤肥料研究所	20	127	7.0	11.0
4	贾宪波	福建省农业科学院土壤肥料研究所	8	8	2.0	2.0
5	陈龙军	福建省农业科学院土壤肥料研究所	12	21	3.0	3.0
6	方宇	福建省农业科学院土壤肥料研究所	9	98	4.0	9.0