红景天苷单克隆抗体的制备及间接竞争酶联免疫方法的建立

• 作者: 伏光华 张海丽 王伟 胡立新
• 来源期刊: 福建农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 红景天苷 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫法
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 食品科学
• 页码范围: 595-599
• 页数: 5页
• 分类号: S853.72
• 字数: 3556字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2019.05.013

摘要

[目的]制备红景天苷单克隆抗体,建立红景天苷间接竞争酶联免疫方法,实现经济、高效、简便快速批量检测红景天药材及其制品中的红景天苷含量,为其商品化检测试剂盒开发奠定基础.[方法]用已经成功偶联的红景天苷-BSA作为免疫原,免疫6～8周龄Balb/c小鼠,ELISA检测血清效价,取效价最高的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,经有限稀释法筛选、克隆后获得能够稳定产生红景天苷单克隆抗体的细胞株,体内诱生腹水制备大量红景天苷单克隆抗体.利用该抗体,建立红景天苷间接竞争酶联免疫分析方法并进行方法学确认,包括日内精密度、日间精密度、回收率等指标.[结果]建立的间接竞争酶联免疫吸附分析方法的线性范围为4.07～598.45 ng·mL-1,检测限IC10为1.77 ng·mL-1,半数抑制率IC50为49.33 ng·mL-1,日内精密度和日间精密度均小于4.5％,加标样品的平均回收率为94.3％,红景天苷含量检测结果与高效液相色谱法一致.[结论]本研究成功制备了红景天苷单克隆抗体,建立了间接竞争酶联免疫分析方法,能够用于为红景天苷含量的快速检测提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张海丽		3	16	2.0	3.0
2	王伟		1	0	0.0	0.0
3	胡立新		1	0	0.0	0.0
4	伏光华		1	0	0.0	0.0