山羊IL-9基因克隆表达与单克隆抗体的制备

• 作者: 严若峰 宋小凯 徐立新 李庆江 李祥瑞 黄鑫
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 IL-9 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 69-75
• 页数: 7页
• 分类号: S852.73+9
• 字数: 4254字
• 语种: 中文

摘要

为了研究捻转血矛线虫诱导山羊产生Th9型免疫应答的特点,制备了抗山羊IL-9单克隆抗体.采用基因克隆、表达和纯化得到重组蛋白IL-9,并以重组IL-9为免疫原,重组蛋白IL-9和His-tag为筛选抗原,通过杂交瘤细胞技术,筛出1株稳定分泌抗山羊IL-9单克隆抗体细胞株,命名为6A11A8.将该细胞株接种小鼠腹腔,制备腹水,并将纯化后的抗体与生物素耦合,用流式细胞术检测山羊外周血单核细胞(PBMCs)中表达IL-9的细胞亚类.结果 显示:融合蛋白大小约为16 ku,主要分布于包涵体中,筛选出的6AL1A8细胞株产生的抗体效价高、特异性强,其细胞上清抗体效价可达1∶2 430,其抗体亚型为IgG2bκ,层析柱纯化小鼠腹水后其效价可达1∶512 000,该单抗可识别山羊PBMCs中分泌IL-9的亚类细胞.结论:本研究获得了山羊IL-9单克隆抗体,为研究山羊Th9型免疫反应奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李祥瑞	南京农业大学动物医学院	126	1418	20.0	33.0
2	徐立新	南京农业大学动物医学院	57	304	11.0	14.0
3	严若峰	南京农业大学动物医学院	53	256	10.0	13.0
4	宋小凯	南京农业大学动物医学院	32	84	6.0	8.0
5	黄鑫	南京农业大学动物医学院	5	29	2.0	5.0
6	李庆江	南京农业大学动物医学院	1	0	0.0	0.0