维吉尼亚链霉菌P450-105D1在大肠杆菌中 自诱导表达和雄烯二酮的羟化活性

• 作者: 周明辉 张雁 王晶晶 罗学才 陈亚军 韩毛振
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 9-羟基雄烯二酮 微生物转化 细胞色素P450-105D1 自诱导表达
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 46-51
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2019.05.046

摘要

雄烯二酮是甾体药物生产的重要中间体,其C9位羟基化产物9-羟基雄烯二酮也是多种重要甾体药物的合成前体,具有重要的临床药用价值.微生物转化生产9-羟基雄烯二酮具有重要的经济价值.将维吉尼亚链霉菌IBL14中svu005与pET28a质粒融合,导入大肠杆菌BL21(DE3).使用优化的自诱导培养基诱导表达其产物细胞色素P450-105D1(CYP105D1)蛋白,以雄烯二酮等多种甾体作为底物进行微生物羟化.结果显示,构建的重组质粒pET28a-svu005在大肠杆菌中成功表达,使用ZYM培养基,自诱导表达的活性蛋白产量(0.0916 nmol/L)显著高于传统的IPTG诱导方式的产量(0.0367 nmol/L).表达产物CYP105D1可以羟化雄烯二酮,经HPLC检测,产物为9-羟基雄烯二酮.发现了微生物转化合成9-羟基雄烯二酮的新途径,具有很好的工业应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张雁	合肥师范学院生命科学学院	9	6	1.0	1.0
2	王晶晶	合肥师范学院生命科学学院	9	6	1.0	2.0
3	韩毛振	华中科技大学生命科学与技术学院	2	0	0.0	0.0
4	罗学才		1	0	0.0	0.0
5	周明辉	合肥师范学院生命科学学院	14	27	3.0	4.0
6	陈亚军	合肥师范学院生命科学学院	8	2	1.0	1.0