基于CRISPR-Cas9系统的Saccharomyces cerevisiae基因删除

• 作者: 冯惠勇 刘金雷 李天明 李子怡 杨天勇 牛潇迪
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 酿酒酵母 CRISPR-Cas9 基因组工程 基因敲除
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 151-158
• 页数: 8页
• 分类号: Q789
• 字数: 4711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20180125-317

摘要

建立CRISPR-Cas9介导的在Saccharomyces cerevisiae双倍体细胞中进行基因敲除的方法.以can1基因敲除后的表型验证该CRISPR-Cas9系统的有效性,can1基因的失活效率达到4％.利用该系统又分别敲除Tpdc、adh3、adh2、adh1、pdh等基因,单基因编辑效率分别为4/48、3/48、1/48、3/28、1/16.确定了基因连续敲除的方法流程,pdc、adh3、adh2三个基因全部敲除,整个过程用时17d.探索了双基因一次转化同时敲除的方法,将adh5、lip两个基因同时敲除用时6d,基因编辑效率分别为9/32和10/32.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯惠勇	河北科技大学生物科学与工程学院	26	260	10.0	15.0
2	刘金雷	河北科技大学生物科学与工程学院	12	20	2.0	3.0
3	李天明	河北科技大学生物科学与工程学院	16	25	3.0	4.0
4	牛潇迪	河北科技大学生物科学与工程学院	1	0	0.0	0.0
5	杨天勇	河北科技大学生物科学与工程学院	1	0	0.0	0.0
6	李子怡	马里兰大学帕克分校文理科学学院	1	0	0.0	0.0