氨浓度升高对CHO细胞维持期抗体融合蛋白的表达及N-糖基化的影响

• 作者: 刘旭平 范里 谭文松 赵亮 陈欣宁
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: CHO细胞培养 氨 抗体融合蛋白 N-糖基化 唾液酸
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 93-102
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0629

摘要

为了深入理解在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞流加培养过程中氨对抗体融合蛋白表达和N-糖基化的作用,认识氨影响N-糖基化加工的作用位点,考察了在细胞维持期(产物表达期)不同氨浓度条件与CHO细胞维持与代谢、抗体融合蛋白表达和N-糖链结构的关系.结果 显示,氨浓度在5-12 mmol/L范围内对维持期的细胞生长曲线、葡萄糖和谷氨酰胺的消耗以及乳酸和氨的生成情况没有明显影响.但当氨浓度大于5 mmol/L时,随着氨浓度的升高,抗体融合蛋白的唾液酸化程度和半乳糖化程度均不断降低,而岩藻糖基化程度和高甘露糖糖型比例则没有变化.当氨浓度升高至大于9 mmol/L后,抗体融合蛋白的表达能力和最终表达量开始降低.因此,应在细胞培养工艺过程开发时控制氨的生成至小于5 mmol/L,以避免氨的累积导致产物的半乳糖化和唾液酸化程度降低以及产物表达量下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭文松	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	142	699	13.0	17.0
2	范里	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	17	68	6.0	7.0
3	刘旭平	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	19	47	4.0	6.0
4	赵亮	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	25	84	5.0	7.0
5	陈欣宁	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	2	4	1.0	2.0