下调Skp2表达抑制骨肉瘤U2OS细胞恶性表型的实验

• 作者: 丁路 孙荣鑫 白靖平
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 S期激酶相关蛋白2 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 395-400
• 页数: 6页
• 分类号: R738.1
• 字数: 4230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2019.18.1339

摘要

目的 通过使用小干扰RNA(siRNA)降低骨肉瘤中S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,探讨Skp2对骨肉瘤恶性生物学行为的影响及其分子机制.方法 转染Skp2 siRNA敲低骨肉瘤U2OS细胞中Skp2的表达.通过RT-qPCR和Western blot法检测细胞内Skp2的mRNA和蛋白表达水平,确定Skp2 siRNA的沉默效率.MTT法检测细胞增殖情况,PI单染及Annexin V/PI双染后用流式细胞仪检测对骨肉瘤细胞周期及凋亡的影响.Transwell实验和钙黄绿素乙酰甲酯(Calcein-AM)染色检测细胞的迁移和侵袭.Western blot检测细胞内Skp2的下游基因p21、p27、p-Akt及E-cadherin的表达变化.结果 转染Skp2 siRNA在U2OS细胞中获得较高的敲除效率.Skp2表达下调抑制了骨肉瘤细胞的增殖,并且使细胞生长阻滞在G0/G1期,细胞的凋亡率明显增加.抑制Skp2后U2OS细胞的侵袭和迁移能力明显降低.U2OS细胞Skp2敲低后其下游调控分子p21、p27及E-cadherin的表达显著升高,而p-Akt的表达则明显减弱.结论 Skp2在骨肉瘤细胞中发挥癌基因的作用,通过调控其信号通路中p21、p27、p-Akt及E-cadherin的表达影响细胞生长、周期、凋亡、侵袭和迁移能力等恶性生物学行为.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白靖平	新疆医科大学附属肿瘤医院骨与软组织肿瘤科	158	645	12.0	17.0
2	孙荣鑫	新疆医科大学第六附属医院关节外科	24	127	7.0	10.0
3	丁路	新疆医科大学第五附属医院骨一科	14	42	4.0	6.0