摘要:
背景:骨组织工程的发展, 为解决骨缺损修复提供了新手段, 而其中的支架载体选材和结构构建是目前的热点问题.目的:采用石蜡微球沥滤技术制备具有仿生大孔结构的丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架, 分析其细胞相容性.方法:以丝素蛋白和纳米羟基磷灰石为原料, 采用石蜡微球沥滤技术制成具有仿生大孔结构的丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架, 利用体式显微镜和扫描电镜观察支架结构, 测量支架的弹性模量.将第3代兔脂肪间充质干细胞接种于丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架上, 培养48 h后, LIVE/DEAD染色观察细胞活性;培养1周, 苏木精-伊红染色观察细胞黏附情况;培养3 d, 扫描电镜观察支架-细胞复合物;培养1, 3, 5, 7 d, CCK-8法检测细胞增殖, 以单纯细胞培养为对照.结果与结论:①体式显微镜下可见丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架呈乳白色, 扫描电镜显示无论在支架横截面还是纵切面上, 均可见均匀排列的大孔结构, 连通性好, 支架孔径为 (362.23±26.52) μm, 弹性模量为 (54.93±5.44) kPa;②扫描电镜显示, 脂肪间充质干细胞能够很好地在支架孔壁及连通孔隙内黏附和伸展, 分泌大量细胞外基质, 填充在丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架孔隙内;③苏木精-伊红染色显示, 脂肪间充质干细胞均匀黏附在丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架孔隙内壁上, 并且大量增殖;④LIVE/DEAD染色显示脂肪间充质干细胞活性良好;⑤CCK-8检测结果显示, 脂肪间充质干细胞在丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架可良好地生长与增殖;⑥结果表明, 丝素蛋白/纳米羟基磷灰石支架具有良好的孔径与细胞相容性.