人角膜基质间充质干细胞的分离培养及表型鉴定

• 作者: 刘先宁 刘睿 安娜 朱秀萍 汪耀 潘士印 王亚妮 程燕 肖湘华 银勇
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人角膜基质间充质干细胞 体外分离培养 表型鉴定
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 28-30,34
• 页数: 4页
• 分类号: R446.8
• 字数: 2170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2019.04.007

摘要

目的 建立人角膜基质间充质干细胞(HCS-MSC)体外分离培养、传代和鉴定等方法.方法 无菌条件下,取眼科临床角膜移植术后剩余的供体角膜缘组织,去除上皮和内皮组织,将基质组织切成1mm×2mm的组织块,采用无动物源性血清的间充质干细胞培养液进行组织块贴壁法培养,倒置显微镜下动态观察细胞的生长形态及贴壁状态,将传代培养后的第三代细胞采用流式细胞分析法进行表型鉴定,液氮冷冻保存.结果 采用人角膜缘基质组织块贴壁法培养,于培养后第7天开始向周围呈放射状长出细胞,14天左右长满培养皿,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于2～4天达90％融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90,CD29和CD105阳性率＞95％,CD34和CD-HLA-dr阳性率＜3％.结论 采用人角膜缘基质组织可分离培养出间充质干细胞,为角膜组织修复、重建及对抗免疫排斥反应等奠定基础.