地方株马驽巴贝斯虫Bc48截短体单克隆抗体的制备及应用

• 作者: 吾力江 宋晶晶 巴音查汗 张梦圆 李敏 樊新丽 王盼举
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马驽巴贝斯虫 Bc48基因 单克隆抗体 CI-ELISA
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 1882-1887
• 页数: 6页
• 分类号: S852.723
• 字数: 3988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2019.09.016

摘要

本研究旨在建立马驽巴贝斯虫抗体的快速、准确检测方法.以纯化的马驽巴贝斯虫Bc48基因片段的原核表达产物免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备单克隆抗体,并利用重组抗原与单克隆抗体建立间接竞争ELISA(CI-ELISA)方法检测马驽巴贝斯虫抗体.结果 显示:制备出3株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为1H2、7F4、11F4,通过对CI-ELISA条件筛选得出,抗原最佳包被浓度为0.19 /μg· mL-1,单克隆抗体11F4的最佳工作浓度为1∶3.2×10 5,通过检测30份马驽巴贝斯虫阴性血清及20份阳性血清,确定该检测方法临界值为45％;特异性试验发现,该CI-ELISA方法不与感染马泰勒虫病的阳性血清发生反应,具有特异性;用所建立的CI-ELISA检测临床血清90份,与标准c-ELISA试剂盒总符合率为92.2％、阳性符合率92.1％、阴性符合率94.1％.试验结果表明,该CI-ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便.基于单克隆抗体(11F4)与重组蛋白(HIS-Bc48)所建立的CI-ELISA特异性、重复性好,可为新疆马驽巴贝斯虫的检测、监控提供有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	巴音查汗	新疆农业大学动物医学学院	150	688	13.0	17.0
2	张梦圆	新疆农业大学动物医学学院	10	4	1.0	1.0
3	宋晶晶	新疆农业大学动物医学学院	8	4	1.0	1.0
4	王盼举	新疆农业大学动物医学学院	8	9	2.0	3.0
5	李敏	新疆农业大学动物医学学院	17	126	7.0	11.0
6	樊新丽	新疆农业大学动物医学学院	7	0	0.0	0.0
7	吾力江	新疆农业大学动物医学学院	11	1	1.0	1.0