幽门螺杆菌菌落PCR的优化

• 作者: 刘芳 吴芳草 崔古贞 文学琴 王彩霞 綦廷娜 陈峥宏
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 螺杆菌,幽门 高通量筛选 分子诊断技术 煮沸速冻裂解法 菌落PCR
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 762-766
• 页数: 5页
• 分类号: R378.3
• 字数: 2134字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2019.07.004

摘要

目的:通过对常规菌落PCR方法进行优化,探索提高幽门螺杆菌(H.pylori)菌落PCR扩增效率的方法.方法:提取H.pylori 26695基因组DNA作为阳性对照组,以未经任何处理的H.pylori 26695菌落作为阴性对照组,经煮沸裂解速冻法获得的H.pylori 26695菌落作为试验组,随机选择8个不同的基因(16S rDNA、cagA-U、cagA-D、iceA、ureA、ropN、ropN、Hp0792)作为菌落PCR的候选基因进行菌落PCR验证,最后以1％琼脂糖凝胶进行电泳检测.结果:在选择的目标基因中,阴性对照组未扩增出目的条带,试验组与阳性对照组均扩增出目的相应大小的条带;与常规菌落PCR比较,煮沸速冻裂解法能显著提高H.pylori菌落PCR的扩增效率.结论:煮沸速冻裂解法可用于H.pylori的高通量筛选鉴定和分子诊断.