猪PKM2基因在肺炎支原体感染3 D4/21细胞后的互作蛋白质鉴定与分析

• 作者: 付言峰 任守文 徐小波 方晓敏 李碧侠 涂枫 王丽 赵为民 陈哲
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 PKM2基因 肺炎支原体 互作蛋白质 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 1381-1389
• 页数: 9页
• 分类号: S852.62
• 字数: 5420字
• 语种: 中文

摘要

通过构建含有HA标签的PKM2过表达质粒转染3D4/21细胞,利用免疫共沉淀(Co-IP)与液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术分析与鉴定猪PKM2基因在肺炎支原体感染猪肺泡巨噬细胞3D4/21后的互作蛋白质,并对这些互作蛋白质进行GO与KEGG通路分析.结果显示肺炎支原体感染3D4/21细胞后,PKM2在mRNA水平和蛋白质水平上表达上调,其表达水平呈现剂量与时间依懒性.免疫共沉淀反应结果显示IP与IgG组共鉴定到72个蛋白质,这2组鉴定到的蛋白质数分别为60和19,其中7个蛋白质在2组中同时鉴定到.GO分析结果表明IP组的互作蛋白质主要参与了NAD代谢过程、NADH代谢过程、肌原纤维组装、NADH再生和葡萄糖代谢丙酮酸等生物过程,其中大多数与能量代谢有关.KEGG pathway分析结果表明互作蛋白质参与了致病性大肠杆菌感染、军团杆菌病、糖酵解/糖异生、丙酮酸代谢和癌症中的中枢碳代谢等通路,这些通路与细菌感染和能量代谢有关.