长链非编码RNA F19对小鼠创伤性脑损伤后继发性脑损伤的影响

• 作者: 刘亮 吴越 孙晓川 庞金伟 廖玉嫣 彭建华 曹芳 母前程 江涌 涂天琦 谢雨珂 郭科成 陈礼刚
• 来源期刊: 中华创伤杂志
• 关键词: 脑损伤 长链非编码RNA Toll样受体4 凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 267-273
• 页数: 7页
• 字数: 4777字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-8050.2019.03.015

摘要

目的 探讨长链非编码RNA F19(lncRNA F19)对小鼠创伤性脑损伤(TBI)后继发性脑损伤的影响.方法 (1)96只野生型C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术组、假手术+空载病毒组、假手术+lncRNA F19慢病毒组、TBI组、TBI+空载病毒组及TBI+lncRNA F19慢病毒组,每组下设TBI后1 d和3 d两个亚组,各亚组8只.检测lncRNA F19表达情况及沉默效率.(2)将96只野生型C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI+空载病毒组及TBI+lncRNA F19慢病毒组,每组下设TBI后1 d和3 d两个亚组,各亚组16只.观察lncRNA F19对TBI后神经元凋亡的影响.采用控制性皮层损伤法(CCI)建立小鼠TBI模型.F19慢病毒及空载病毒为造模前5 d经侧脑室注射.伤后1 d,3 d,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测lncRNA F19相对表达量(2-ΔΔct);Western blot法检测脑组织Toll样受体4(TLR4)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;TUNEL染色检测创伤灶周围神经元凋亡情况.结果 从伤后第1天开始,无论是假手术还是TBI后,空载病毒对lncRNA F19的表达无影响(P>0.05).伤后第1天,与假手术+空载病毒组比较,假手术+lncRNA F19慢病毒组脑组织lncRNA F19表达量明显下降(0.07±0.07:0.93±0.17),与TBI+空载病毒组比较,TBI+lncRNA F19慢病毒组脑组织lncRNA F19表达量明显下降(2.91±1.18:0.52±0.32)(P均<0.05).与TBI+空载病毒组比较,TBI+lncRNA F19慢病毒组脑组织TLR4(0.51±0.13:0.66±0.15)、Bax(0.45±0.06:0.67±0.16)蛋白相对表达量及TUNEL神经元凋亡比例[(23.55±6.85)％:(31.58±7.52)％]均明显降低(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量(0.76±0.16:0.47±0.12)明显升高(P<0.05).伤后第3天,与假手术+空载病毒组比较,假手术+lncRNA F19慢病毒组脑组织lncRNA F19表达量明显下降(0.11±0.09:0.96±0.09),与TBI+空载病毒组比较,TBI+lncRNA F19慢病毒组脑组织lncRNA F19表达量明显下降(0.54±0.24:3.39±0.90)(P均<0.05).与TBI+空载病毒组比较,TBI+lncRNA F19慢病毒组脑组织TLR4(0.60±0.20:0.85±0.09)、Bax(0.60±0.12:0.88±0.21)蛋白相对表达量及TUNEL神经元凋亡比例[(29.10±7.37)％:(39.22±10.64)％]均明显降低(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量(0.66±0.12:0.35±0.16)明显升高(P<0.05).结论 抑制lncRNA F19可有效减少小鼠TBI后TLR4介导的皮层神经元凋亡,从而减轻继发性脑损伤.