可视化多重荧光LAMP鉴别诊断牛轮状病毒和产肠毒素性大肠杆菌的研究

• 作者: 刘加波 张艳芳 曾婷婷 王盛 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛 轮状病毒 产肠毒大肠杆菌 多重LAMP 检测
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1119-1127
• 页数: 9页
• 分类号: S852.659.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0140

摘要

本研究旨在建立一种同时检测牛轮状病毒(BRV)和产肠毒大肠杆菌(ETEC)的多重荧光LAMP检测方法.根据GenBank中BRV和ETEC的基因保守区域设计3套LAMP引物,在每条内引物FIP的5'端标记荧光基团,在同一体系中进行多重LAMP扩增,对各反应条件进行优化,应用该方法对采集自广西各地牛场的56份样品进行检测.结果 显示,该方法能特异地鉴别牛轮状病毒和产肠毒大肠杆菌,并与其他对照病原不发生交叉反应;每个反应的检测灵敏度均为100拷贝.对56份腹泻样品的检测结果显示,BRV的感染率为14.3％,ETEC的感染率为57.1％,2种病原的混合感染率为8.9％;与荧光PCR和常规PCR检测方法相比,此多重LAMP方法敏感性为100％,符合率为100％.建立的方法可快速、准确地检测2种犊牛腹泻病原体,为病原学诊断和分子流行病学调查提供了有效技术支持.