肝素结合表皮生长因子调控核因子κB诱导卵巢上皮性癌紫杉醇耐药的作用及机制

• 作者: 卢美松 李萌 汤小晗 邓锁
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 肝素结合表皮生长因子 核因子κB 卵巢肿瘤 紫杉酚
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 255-261
• 页数: 7页
• 字数: 6179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2019.04.008

摘要

目的 探讨肝素结合表皮生长因子(HB-EGF)通过上调核因子κB(NF-κB)的表达从而诱导卵巢上皮性癌(卵巢癌)对紫杉醇耐药的作用及可能的机制.方法(1)NF-κB表达的检测:将卵巢癌亲本细胞系A2780细胞和紫杉醇耐药细胞系A2780/Taxol细胞及其对应的裸鼠分成4组,即A2780组、A2780+交叉反应物质197(CRM197,为HB-EGF抑制剂)组、A2780/Taxol组和A2780/Taxol+CRM197组,采用双重免疫荧光染色法检测4组卵巢癌细胞中HB-EGF和表皮生长因子受体(EGFR)蛋白的表达,蛋白印迹法(western blot法)检测4组卵巢癌细胞中NF-κB的表达,免疫组化SP法检测4组裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达.(2)NF-κB功能的检测:将A2780/Taxol细胞分4组,即空载体组、NF-κB小分子干扰RNA(siRNA)组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测4组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的耐药性[以50%抑制浓度(IC50)表示],western blot法检测4组A2780/Taxol细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达,流式细胞仪检测4组A2780/Taxol细胞中P-gp的功能[以细胞内累积的若丹明(Rh123)的荧光强度表示].结果(1)NF-κB表达的检测:A2780组、A2780+CRM197组、A2780/Taxol组和A2780/Taxol+CRM197组细胞中HB-EGF蛋白的表达水平分别为(5.6±1.3)、(2.1±1.2)、(11.7±3.5)、(6.2±1.4)分,EGFR蛋白的表达水平分别为(5.1±1.6)、(2.8± 0.6)、(10.4±3.1)、(5.6±1.9)分,NF-κB蛋白的表达水平分别为1.89±0.23、0.74±0.12、3.45±0.16、1.31± 0.08;4组裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达水平分别为(3.3±1.1)、(1.4±0.4)、(8.7±2.3)、(3.6±1.2)分.其中,A2780组和A2780/Taxol组细胞中HB-EGF、EGFR、NF-κB蛋白的表达水平及裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达水平分别高于A2780+CRM197组和A2780/Taxol+CRM197组,而A2780组细胞中HB-EGF、EGFR、NF-κB蛋白的表达水平及裸鼠移植瘤组织中NF-κB蛋白的表达水平低于A2780/Taxol组,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)NF-κB功能的检测:空载体组、NF-κB siRNA组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50分别为(39.4± 0.8)、(7.6±0.6)、(6.7±0.5)、(4.2±0.4)μmol/L,4组A2780/Taxol细胞中P-gp蛋白的表达水平分别为3.11±0.23、1.45±0.16、1.73±0.21、0.68±0.14,4组A2780/Taxol细胞内的Rh123荧光强度分别为110±15、246±19、231±22、296±24.其中,NF-κB siRNA组、空载体+CRM197组、NF-κB siRNA+CRM197组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50及细胞中P-gp蛋白的表达水平均明显低于空载体组(P＜0.01),而细胞内Rh123荧光强度明显高于空载体组(P＜0.01);NF-κB siRNA组、空载体+CRM197组A2780/Taxol细胞对紫杉醇的IC50及细胞中P-gp蛋白的表达水平均明显高于NF-κB siRNA+CRM197组(P＜0.01),而细胞内Rh123荧光强度明显低于NF-κB siRNA+CRM197组(P＜0.01).结论 NF-κB的表达与卵巢癌紫杉醇耐药相关,HB-EGF可能通过调控EGFR/NF-κB/P-gp信号通路诱导卵巢癌对紫杉醇产生耐药.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢美松	哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科	73	319	10.0	15.0
2	邓锁	哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科	28	166	7.0	11.0
3	李萌	哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科	55	254	8.0	13.0
4	汤小晗	哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科	24	74	5.0	6.0