基于转录组测序的冈田绕眼果蝇aoattacin基因筛选及在昆虫细胞中表达、抑菌活性检测

• 作者: 刘晖 刘流 曹建平 王灵军 蔡娟 郑明辉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 冈田绕眼果蝇 转录组 抗菌肽 真核表达 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 118-124
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0157

摘要

通过分析冈田绕眼果蝇转录组数据得到抗菌肽aoattacin基因,在昆虫细胞Sf9中表达并检测其抑菌活性.通过转录组分析得到抗菌肽aoattacin基因,全基因合成其序列,构建重组pFast-bac1-aoattacin载体,通过转染DH10Bac细胞获得重组杆状病毒,转染昆虫Sf9细胞,以获得P1代病毒和通过扩增获得P2代病毒,并检测基因在Sf9细胞里的表达.通过SDS-PAGE和Western Blot检测蛋白表达情况,通过最小抑菌浓度测定表达产物的抑菌活性.结果 表明通过筛选转录组数据得到一个高表达aoattacin基因,在昆虫细胞Sf9中成功表达,抑菌实验显示抗菌肽Aoattacin对受试革兰氏阳性及阴性菌等多种细菌具有抑制作用,或为一种新型广谱抗菌肽.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹建平	中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所	17	50	3.0	6.0
2	刘晖		3	3	1.0	1.0
3	郑明辉		5	11	2.0	3.0
5	蔡娟		1	2	1.0	1.0
6	刘流		1	2	1.0	1.0
7	王灵军		1	2	1.0	1.0