人ADAM17启动子荧光素酶报告质粒的构建与鉴定

• 作者: 宦宇 张春利 王东江 蔡徐山 齐结华
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 去整合素-金属蛋白酶17 启动子 荧光报告质粒 叉头转录因子M1
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1305-1309
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2471字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)启动子的荧光素酶报告质粒,对不同位点进行定点突变,分析其转录活性.方法 通过生物信息学分析ADAM17启动子区域的叉头转录因子M1(FoxM1)结合位点,以人胃癌细胞系MGC-803基因组为模板,PCR扩增ADAM17基因启动子-1365～+51片段,连接到荧光素酶报告基因载体pGL3-basic中;对FoxM1结合的3个位点进行定点突变;转染至293T细胞后用双荧光素酶报告系统分析其转录活性.结果 测序结果显示,ADAM17启动子荧光素酶报告基因及其突变体均构建成功;与pGL3-basic组相比,pGL3-ADAM17(-1365～+51)组介导的荧光素酶活性明显升高(P<0.05);与对照组相比,过表达FoxM1组介导的荧光素酶活性明显升高(P<0.05),且pGL3-ADAM17(-1365～+51)组高于突变组(P<0.05).结论 成功构建了人ADAM17启动子荧光素酶报告基因及其突变体,初步验证了ADAM17受转录因子FoxM1的转录调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡徐山	上海市嘉定区妇幼保健院检验科	21	70	5.0	7.0
2	齐结华	上海市嘉定区妇幼保健院检验科	8	31	4.0	5.0
3	张春利	上海市嘉定区妇幼保健院检验科	6	1	1.0	1.0
4	宦宇	上海市嘉定区妇幼保健院检验科	6	1	1.0	1.0
5	王东江	上海市嘉定区妇幼保健院检验科	6	18	3.0	4.0