摘要:
目的 检测结直肠癌(CRC)患者血浆外泌体可溶性HLA-G (sHLA-G)水平并评估其临床价值.方法 回顾性研究.选取2017年5月至2018年8月浙江省台州医院收治的原发性CRC患者52例,同时选取25名健康体检者,20例良性结直肠息肉患者,20例慢性肠道炎症作为对照.采用exoEasy Maxi试剂盒提取血浆外泌体,纳米颗粒示踪技术(NTA)和免疫印迹法用于鉴定外泌体.流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测外泌体sHLA-G水平,并用ROC曲线和约登指数(Youden index)分析其与癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)在CRC诊断中的差异.结果 CRC血浆提取的外泌体颗粒大小峰值为101.1 nm,表达CD63、CD81和TSG101蛋白.CRC患者外泌体sHLA-G[28.0 (21.5 ~ 35.1) U/ml]显著高于良性结直肠息肉患者[19.7(16.2~ 22.5)U/ml,U=180.0,P<0.001]、肠道慢性炎症[19.9(16.7~ 25.2) U/ml,U=197.0,P<0.001]和健康对照组[19.6(16.8~ 21.3)U/ml,U=143.0,P<0.001],且术后sHLA-G[19.6(17.8~ 26.3) U/ml,325.5,P=0.015]显著低于术前水平.CRC患者外泌体sHLA-G在肿瘤分期(U=64.0,P=0.006)、淋巴结转移(U=81.0,P=0.003)及TNM分期(U=105.0,P=0.015)等分组中存在显著性差异.ROC曲线分析表明,FCM和ELISA方法测定外泌体sHLA-G、CEA、CA19-9的曲线下面积(AUG)分别为0.962±0.019、0.899±0.038、0.786±0.058、0.680±0.068.AUC经Z检验表明:在诊断CRC效能上,FCM测定外泌体sHLA-G优于CEA (Z=2.884,P=0.004)和CA19-9 (Z=3.994,P<0.001),ELISA测定外泌体sHLA-G优于CA19-9 (Z=2.811,P=0.005).结论 血浆外泌体sHLA-G与CRC患者的疾病进展相关,且在诊断效能上优于传统肿瘤标记物CEA和CA19-9.