胶原静电纺纳米纤维膜对人牙髓细胞生物学行为的影响

• 作者: 刘力 张倩莉 温世鹏 王晓燕 袁重阳
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 胶原 静电纺丝 牙髓再生 纳米纤维 支架
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 28-34
• 页数: 7页
• 分类号: R781.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.19723/j.issn.1671-167X.2019.01.006

摘要

目的:比较人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)在胶原静电纺纳米纤维膜(collagen nanofibrous matrix,Col_NFM)与直接沉积胶原膜(collagen flat film,Col_FF)上的黏附、增殖和分化情况,探究胶原纳米纤维支架对hDPCs生物学行为的影响.方法:采用扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)观察两种胶原膜的表面形貌,并比较其表面接触角和溶胀性能.将hDPCs分别接种于两种胶原膜表面共培养,SEM和激光共聚焦显微镜(laser scanning microscope,LSM)观察hDPCs在支架表面的生长形态,并用CCK-8法测定hDPCs的增殖情况.在诱导14 d后,比较成牙本质分化相关基因的表达变化,茜素红染色观察矿化结节的形成情况.结果:SEM图可见Col_NFM组纤维直径为(884±159) nm,纤维之间存在大量三维连通的孔隙结构,而Col_FF组表面平坦,未见孔隙结构.Col_NFM组瞬间表面接触角为85.03°±4.45°,溶胀度为3,Col_FF组瞬间表面接触角为98.98°±5.81°,溶胀度为l,Col_NFM组的亲水性和溶胀性能更佳.SEM和LSM结果显示,Col_NFM组hDPCs表现为不规则多角形,呈三维生长,Col_FF组细胞在二维平面上呈纺锤形生长.CCK-8结果显示,hDPCs在Col_NFM支架上增殖活性更高.在诱导14d后,Col_NFM组成牙本质分化相关基因表达水平较Col_FF组显著升高(P＜0.05),茜素红染色也更深.结论:Col_NFM具有纳米尺度的微观结构,并具备良好的亲水性和溶胀性能,相较于Col_FF,hDPCs在Col_NFM表面表现出更好的黏附、增殖和分化性能.