一株高效降解羽毛废弃物菌株的筛选及表达条件优化

• 作者: 于江悦 史超硕 张钰文 李玉 袁航 马晓晓
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 角蛋白酶 异源表达 信号肽 芽孢杆菌
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 93-98
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0370

摘要

筛选和构建高效降解羽毛角蛋白的菌株,以提高角蛋白酶分泌表达量.从全国5个不同地方的猪、羊圈土壤中取样,在牛奶平板上进行初筛,以羽毛为唯一碳氮源对产角蛋白酶菌株进行复筛.通过形态学观察、16S rDNA序列分析,对菌株进行分类鉴定.为进一步提高菌株的发酵活力,筛选和优化了5个不同来源的信号肽序列(KerK、YoaW、DacB、NprE和SacB),选用pWB980作为表达载体,构建重组质粒并转化到Bacillus subtilis WB600进行表达.获得一株高效降解羽毛的菌株M,经鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.).37℃C发酵培养48 h后,菌株M角蛋白酶酶活力为21.98 U/mL.通过筛选和优化信号肽,获得含有信号肽DacB的重组菌株R3-DacB,该菌株分泌表达角蛋白酶活力最高,达到了226.34 U/mL,是初始菌株M的10倍.获得了一株降解羽毛废弃物效果较好的重组菌株R3-DacB,对角蛋白酶实现工业化生产具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张钰文	工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
2	袁航	工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
3	于江悦	工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
4	马晓晓	工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0
5	史超硕	工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院	1	0	0.0	0.0