基于PEG介导原生质体转化构建粉红聚端孢荧光标记

• 作者: 孙广宇 张荣 戴蓬博 梁晓飞
• 来源期刊: 菌物学报
• 关键词: 遗传转化 绿色荧光蛋白 原生质体制备 苹果 心腐病
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 90-97
• 页数: 8页
• 字数: 4988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13346/j.mycosystema.180259

摘要

粉红聚端孢是多种植物的重要病原菌.本研究通过酶解粉红聚端孢幼嫩菌丝细胞壁获得原生质体,用PEG介导原生质体转化将携带GFP基因和博来霉素抗性基因的外源DNA随机插入粉红聚端孢基因组,共获得博来霉素抗性菌株90株,转化效率达18个/μg.选取22株转化子荧光观察,发现均可表达荧光,菌株间荧光强度不同,其中10株转化子荧光表达较强.与野生型相比,突变菌株TR45的菌落生长、产孢量和致病力等生物学特性均未改变,在不含博来霉素的培养皿中继代培养10代荧光仍能稳定表达.本研究构建的高效原生质体制备和PEG介导粉红聚端孢遗传转化方法,可用于该菌基因功能研究,绿色荧光标记菌株可用于病菌侵入、田间监测、侵染循环等发生规律研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙广宇	西北农林科技大学植物保护学院	50	823	14.0	27.0
2	张荣	西北农林科技大学植物保护学院	43	567	14.0	21.0
3	梁晓飞	西北农林科技大学植物保护学院	8	7	2.0	2.0
4	戴蓬博	西北农林科技大学植物保护学院	2	3	1.0	1.0