四种单增李斯特菌常用核酸检测方法的评价与应用

• 作者: 叶长芸 纪顺师
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单增李斯特菌 聚合酶链式反应 实时荧光PCR 环介导等温扩增 多交叉置换扩增
• 年，卷（期）: 2019,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1085-1091,1099
• 页数: 8页
• 分类号: R378.99
• 字数: 4075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.090

摘要

目的 应用聚合酶链式反应(PCR)、实时荧光PCR(Real-time PCR)、环介导等温扩增(LAMP)和多交叉置换扩增(MCDA)4种核酸检测方法,对单增李斯特菌进行检测,探索特异、灵敏、高效,且适用于肉类样本中单增李斯特菌检测的核酸检测方法.方法 比较文献报道的以单增李斯特菌特异性基因lm00733作为靶标的4种核酸检测方法,评价这4种方法在特异性、灵敏度、检出速率方面的差异,并应用于单增李斯特菌模拟样本和猪肉样本中单增李斯特菌的检测.结果 传统PCR、Real-time PCR、LAMP和MCDA方法都能准确检测单增李斯特菌,其中MCDA方法检测下限为10 fg/反应,且能在30min内完成对样本核酸的检测,灵敏度和检出速率优于其它3种核酸诊断方法;MCDA方法对于模拟样本和实际样本的检测效率优于其它3种核酸检测方法和传统分离培养方法,能够提高样本检测的阳性率.结论 MCDA方法作为一种特异、灵敏和高效的核酸检测方法,可用于肉制品中单增李斯特菌检测时的快速筛查,并能提高传统分离培养方法对标本中单增李斯特菌的阳性检出率.