miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮细胞增殖的实验研究

• 作者: 刘静 张磊 白淑玮 陈莉 雷春灵
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: miR-29b LC3 自噬 视网膜色素上皮细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 805-808
• 页数: 4页
• 分类号: R774
• 字数: 4145字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞增殖的作用.方法 通过病毒颗粒包装转染RPE细胞24 ～ 72 h,在倒置荧光显微镜下观察荧光强度检测感染效率,利用实时定量PCR检测miR-29b mRNA表达.采用凝血酶刺激RPE细胞增殖模拟增生性玻璃体视网膜病变模型.使用0.5 ×103 U·L-1凝血酶预刺激1h,然后分别加入miR-29b和Lenti-vector空载体刺激24 h.分为空白对照组(Sham组)、凝血酶刺激组(RPE组)、凝血酶刺激组+miR-29b过表达组(RPE+ Lenti-29b组)、凝血酶刺激组+空载体组(RPE+ Lenti-vector组).利用MTT微量酶比色法检测各组RPE细胞增殖情况,Western blot观察微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)Ⅱ表达变化.结果 在倒置荧光显微镜下观察发现,RPE+ Lenti-29b组和RPE+ Lenti-vector组90％以上的RPE细胞成功转染,且RPE+ Lenti-29b组miR-29 mRNA水平高表达,与其余3组相比差异均有统计学意义(均为P＜0.01).与Sham组比较,其余3组RPE细胞增殖明显,差异均有统计学意义(均为P＜0.05),LC3Ⅱ蛋白表达也明显升高,差异均有统计学意义(均为P ＜0.05);与RPE+ Lenti-29b组比较,RPE组和RPE+ Lenti-vector组细胞增殖明显(均为P＜0.05),但LC3Ⅱ蛋白表达明显低于RPE+ Lenti-29b组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 上调miR-29b表达可激活RPE细胞中LC3Ⅱ蛋白表达,提高细胞自噬水平,抑制RPE细胞增殖,可能在增生性玻璃体视网膜病变发生及发展中扮演重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张磊	空军军医大学西京医院神经外科	13	29	4.0	5.0
2	陈莉	北京市健宫医院眼科	2	0	0.0	0.0