食品级乳酸乳球菌pNZ8149-luc质粒的构建及表达

• 作者: 何小稳 姚孟霞 张菁芸 彭江龙 易国辉 陈锦萍
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 乳酸乳球菌 食品级 荧光素酶 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1649-1652,1623
• 页数: 5页
• 分类号: R-33|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.09.010

摘要

目的:构建能够稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因(luc)的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,L.lactis)食品级表达系统,以便后续研究对目的基因进行示踪.方法:从pGL4.10质粒中PCR扩增萤火虫荧光素酶报告基因,测序,克隆至载体pNZ8149,构建pNZ8149-luc表达质粒;电击转化宿主乳酸乳球菌NZ3900,采用乳糖筛选法获得重组的乳酸乳球菌,Nisin诱导,采用微孔板发光检测仪检测荧光素酶的存在,Western Blot检测目标蛋白luc的表达.结果:PCR扩增的荧光素酶报告基因成功克隆至pNZ8149质粒,并电击转化宿主乳酸乳球菌NZ3900,得到乳酸乳球菌表达系统NZ3900/pNZ8149-luc.Nisin诱导后,检测到荧光素酶随诱导时间的延长活性逐渐增强,时间超过24 h之后荧光素酶活性逐渐下降.Western Blot检测到目标蛋白luc在胞内表达.结论:成功构建了pNZ8149-luc表达载体,并能够在乳酸乳球菌体内稳定表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭江龙		28	93	6.0	8.0
2	易国辉		24	37	4.0	5.0
3	何小稳		14	11	2.0	2.0
4	陈锦萍		6	3	1.0	1.0
5	姚孟霞		3	1	1.0	1.0
6	张菁芸		3	1	1.0	1.0