棉花细胞质雄性不育系‘07-113A’与其保持系线粒体差异基因发掘与表达分析

• 作者: 周步进 周瑞阳 孔祥军 廖小芳 李敏 李斌 李枝玲 郑杰
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 细胞质雄性不育 RFLP atpA 基因表达
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 页码范围: 59-69
• 页数: 11页
• 分类号: S562
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2019.11.07

摘要

为发掘棉花细胞质雄性不育相关基因,采用RFLP分子标记、Northern blot、同源克隆及RT-qPCR的方法,对离核木棉细胞质雄性不育系‘07-113A’及其保持系‘07-113B’进行线粒体差异基因发掘和表达分析.结果 表明:1)以12个线粒体基因为探针,结合EcoR Ⅰ和HindⅢ2种限制性内切酶对不育系和保持系进行RFLP分析,发现atpA/EcoR Ⅰ及ccmB/EcoR Ⅰ 2个基因/酶组合存在RFLP多态性;2)以atpA和ccmB为探针,对‘07-113A’和‘07-113B’进行Northern blot分析,检测到atpA、ccmB在不育系和保持系中转录本大小均相同;3)获得atpA的CDS全长及其部分侧翼序列,比对结果表明,不育系和保持系的atpA编码序列相同;与保持系相比,不育系5'端侧翼序列有2个碱基的变异,3'端侧翼序列有4个碱基的变异;4)RT-qPCR分析发现,不育系中atpA在败育后的表达量是保持系的0.44倍,极显著低于保持系.推测‘07-113A’花粉败育可能与atpA的异常表达相关.