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摘要:
为表达猪流行性腹泻病病毒(porcine epidemic diarrhea,PEDV)纤突蛋白,利用Mega7基于PEDV纤突蛋白氨基酸序列进行遗传进化分析,选择新发流行毒株纤突蛋白基因,以重组水泡性口炎病毒(rVSVMT)为载体,在rVSVMT基因组G和L间插入目的基因,通过反向遗传学技术拯救VSVMT-S△19重组病毒,Western blot和RT-PCR鉴定重组病毒是否成功表达PEDV纤突蛋白,采用一步生长曲线鉴定VSV MT-S△19在Vero细胞中的生长特性,并与弗氏佐剂混合后肌肉注射小鼠探究其在动物体内的免疫效果.遗传进化分析发现,插入rVSVMT的纤突蛋白基因序列PEDV/CHN/SH-2012-5属于PEDV新发流行毒株GⅡ型;RT-PCR分析重组病毒表达纤突蛋白基因无突变;Western blot鉴定显示出PEDV纤突蛋白和VSV病毒特征条带;一步生长曲线表明重组病毒VSVMT-S△19体外复制滴度可达108 TCID50/mL,与VSVMT-GFP无显著性差异(P>0.05);小鼠动物试验结果表明,重组病毒成功激发PEDV中和抗体产生,与对照PBS接种组差异显著(P<0.05).研究表明,利用重组水泡性口炎病毒(rVSVMT)为载体表达GⅡ型PEDV纤突蛋白能有效激发机体产生高水平中和抗体,为PEDV亚单位疫苗的研制提供了理论和实践依据.
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文献信息
篇名 表达猪流行性腹泻病毒纤突蛋白的重组水泡性口炎病毒构建和鉴定
来源期刊 畜牧与兽医 学科 农学
关键词 水泡性口炎病毒 猪流行性腹泻病 S蛋白
年,卷(期) 2019,(2) 所属期刊栏目 预防兽医
研究方向 页码范围 76-82
页数 7页 分类号 S852.6
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 方心葵 上海交通大学农业与生物学院 21 104 6.0 9.0
3 赵秋华 16 28 3.0 4.0
4 孙涛 上海交通大学农业与生物学院 57 511 11.0 20.0
10 柯勇 上海交通大学农业与生物学院 1 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
水泡性口炎病毒
猪流行性腹泻病
S蛋白
研究起点
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畜牧与兽医
月刊
0529-5130
32-1192/S
大16开
南京卫岗1号南京农业大学内
28-42
1950
chi
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