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miR-7-5p靶向调控POLE4对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y体外增殖和侵袭的影响研究
miR-7-5p靶向调控POLE4对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y体外增殖和侵袭的影响研究
作者:
刘志洋
李富江
董蒨
郝希伟
陈鑫
韩芦芦
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
神经母细胞瘤
细胞增殖
侵袭
摘要:
目的 探讨微小RNA-7-5p(microRNA-7-5p,miR-7-5p)对POLE4蛋白[Polymerase(DNA-directed),epsilon 4,POLE4]的调控作用及其对神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞SH-SY5Y体外增殖 、侵袭的影响.方法 利用生物信息学软件预测miR-7-5p的靶基因为POLE4;运用荧光素酶实验验证miR-7-5P对POLE4的直接靶向作用.将SH-SY5Y细胞分为miR-7-5p过表达实验组(miR-7-5p组)、阴性对照组和空白对照组并进行细胞转染,运用RT-PCR、Western Blot实验检测转染后的SH-SY5Y细胞中POLE4 mRNA和蛋白的表达量,然后通过克隆形成实验和Transwell小室法检测转染后的SH-SY5Y细胞的体外增殖活力和侵袭能力的变化.结果 运用TargetScan、PicTar和miRanda软件预测miR-7-5p的靶基因为PLOE4.RT-PCR和Western Blot实验显示,miR-7-5p组中POLE4 mRNA和POLE4蛋白的相对表达量分别为0.53±0.04和0.26±0.02,与阴性对照组和空白对照组相比,表达水平均下调明显,且差异有统计学意义(P均<0.05).说明miR-7-5p能够显著抑制POLE4 mRNA和POLE4蛋白的表达.过表达miR-7-5p后,miR-7-5p组集落形成数为(87±3)个,较阴性对照组(138±3)个和空白对照组(156±4)个明显减少,且差异有统计学意义(P<0.05).说明miR-7-5p可以下调神经母细胞瘤细胞的增殖活力.Transwell小室检测实验发现,miR-7-5p组穿透基质胶的细胞数为(82±5)个,较空白对照组(349±9)个和阴性对照组(232±5)个明显减少,且差异有统计学意义(P<0.05).说明miR-7-5p对SH-SY5Y细胞的侵袭能力有明显抑制作用.结论 miR-7-5p通过靶向抑制POLE4的表达进一步抑制NB细胞的增殖和侵袭能力,可能作为抑制NB细胞增殖和转移的潜在靶点.
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篇名
miR-7-5p靶向调控POLE4对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y体外增殖和侵袭的影响研究
来源期刊
中华小儿外科杂志
学科
关键词
神经母细胞瘤
细胞增殖
侵袭
年,卷(期)
2019,(9)
所属期刊栏目
临床研究
研究方向
页码范围
844-848
页数
5页
分类号
字数
3832字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2019.09.016
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
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G指数
1
董蒨
青岛大学附属医院小儿外科
92
296
10.0
13.0
2
李富江
青岛大学附属医院小儿外科
17
28
3.0
4.0
3
陈鑫
青岛大学附属医院小儿外科
28
69
5.0
7.0
4
郝希伟
青岛大学附属医院小儿外科
21
114
7.0
10.0
5
韩芦芦
青岛大学附属医院崂山院区手术室
6
27
3.0
5.0
6
刘志洋
青岛市市立医院普外科
2
4
1.0
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细胞增殖
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研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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中华小儿外科杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0253-3006
CN:
42-1158/R
开本:
大16开
出版地:
武汉市胜利街155号
邮发代号:
38-19
创刊时间:
1980
语种:
chi
出版文献量(篇)
8600
总下载数(次)
20
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