miR-199a/mTOR在自发性高血压大鼠心肌纤维化和左心室肥厚中的作用机制研究

• 作者: 于熙滢 周大亮 张春茹 郝丹 魏林
• 来源期刊: 中国循证心血管医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 自发性高血压 心肌纤维化 左心室肥厚 miR-199a 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 大鼠
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 85-89,93
• 页数: 6页
• 分类号: R544.1
• 字数: 5248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4055.2019.01.22

摘要

目的 研究miR-199a和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)对自发性高血压(SHR)大鼠心肌纤维化和左心室肥厚的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 正常雄性WKY大鼠作为正常组(n=15),SHR大鼠随机分为SHR组(n=15)与抑制剂组(n=15).正常组与SHR组大鼠尾静脉注射生理盐水,抑制剂组大鼠尾静脉注射miR-199a抑制剂.采用尾动脉容积法测定三组大鼠血压;超声心动图检测左心室舒张/收缩末期内径(LVEDD/LVESD)、左心室后壁厚度(LVPWT)、室间隔厚度( IVST)、心肌缩短分数(FS)、左心室射血分数(LVEF);右颈总动脉插管记录心功能指标左心室压力最大升高或降低速率(+dp/dt,-dp/dt)、左心室舒张末期内压(LVEDP),测定左心室重量(LVM),并计算左心室质量指数(LVMI);HE染色、Masson染色观察大鼠心肌纤维化程度;实时定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(WB)分析心肌组织中miR-199a和mTOR的mRNA及蛋白表达情况;Pearson评估miR-199a和mTOR相关性.体外培养H9c2细胞,转染miR-199a mimic使其过表达,qRT-PCR、WB检测细胞中miR-199a和mTOR的mRNA及蛋白表达情况;荧光素酶活性检测mTOR是否为miR-199a的靶基因.结果 与正常组相比,SHR组LVEDD、LVESD、IVST、LVPWT均升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与SHR组相比,抑制剂组LVEDD、LVESD、IVST、LVPWT均降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与正常组相比,SHR组收缩压、LVM、LVMI、LVEDP均升高,+dp/dt、-dp/dt降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与SHR组相比,抑制剂组收缩压、LVM、LVMI、LVEDP均降低,+dp/dt、-dp/dt升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与正常组相比,SHR组病理学评分、心肌胶原纤维比例升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与SHR组相比,抑制剂组病理学评分、心肌胶原纤维比例降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与正常组相比,SHR组心肌组织miR-199a mRNA表达升高,mTOR的mRNA及蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05);与SHR组相比,抑制剂组心肌组织miR-199a mRNA表达降低,mTOR 的mRNA及蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).Pearson相关性分析显示,miR-199a与mTOR的mRNA和蛋白表达均呈显著性负相关(r=-4.873,P=0.000;r=-5.126,P=0.000).与空白对照组、阴性转染组相比,miR-199a过表达组miR-199a mRNA表达升高,mTOR的mRNA及蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P均＜0.05).与阴性转染组相比,在转染3’UTR-Wt的细胞中,miR-199a过表达组组荧光素酶活性显著降低(P＜0.05);而在转染3’UTR-Mut的细胞中,miR-199a过表达组与阴性转染组荧光素酶活性无显著差异(P＞0.05).结论 miR-199a表达上调可能与自发性高血压大鼠心肌纤维化和左心室肥厚有关,其机制可能是通过靶向调控mTOR实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏林	黑龙江省哈尔滨市第一医院心内一科	10	18	2.0	4.0
2	郝丹	黑龙江省哈尔滨市第一医院心内一科	10	9	2.0	2.0
3	周大亮	黑龙江省哈尔滨市第一医院心内一科	1	1	1.0	1.0
4	于熙滢	黑龙江省哈尔滨市第一医院心内一科	1	1	1.0	1.0
5	张春茹	黑龙江省哈尔滨市第一医院心内一科	4	3	1.0	1.0