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目的 探讨Shh信号通路对大脑皮质反应性星形胶质细胞(RAS)获得神经干细胞潜能的影响.方法 体外原代培养SD大鼠大脑皮质星形胶质细胞,以肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1α和C1q三种因子诱导炎症型RAS,划痕实验制备创伤型RAS,使用免疫荧光染色法观察细胞形态及纯度.实验分为普通星形胶质细胞组(对照组)、炎症组、划痕组(创伤组).炎症组培养至干预后24 h,对照组和划痕组培养至第5天进行免疫荧光染色观察巢蛋白(Nestin)阳性细胞,运用Western blot技术检测不同损伤模型的细胞中Shh蛋白的表达量.之后各组细胞培养至第7天更换神经干细胞培养基,将前述3组各自再分为激活组(各组细胞更换神经干细胞培养基后添加Shh激活剂SAG)和抑制组(各组细胞更换神经干细胞培养基后添加Shh抑制剂环巴胺)两个亚组,培养14 d后采用qRT-PCR检测各亚组RAS源性神经干细胞相关基因的表达量.结果 细胞损伤模型中,免疫荧光染色证明各组细胞中划痕组Nestin阳性细胞明显多于炎症组和对照组.Western blot结果显示2组损伤细胞中划痕组Shh蛋白表达量高于炎症组(P<0.05).更换神经干细胞培养基后,激活组中2组损伤细胞的干细胞相关基因Nestin、Pax-6、Sox-2、Oct-4和Map-2的表达水平均有所升高,其中由划痕诱导的RAS神经干细胞相关基因Nestin、Pax-6、Sox-2、Oct-4和Map-2的表达水平高于炎症诱导的RAS神经干细胞和普通星形胶质细胞(P<0.01);添加Shh抑制剂后,3组上述基因表达量皆明显降低,但划痕组的表达量仍高于其他2组(P<0.01).结论 在体外,Shh信号通路可以介导损伤后大脑皮质RAS获得干细胞潜能.
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文献信息
篇名 Shh通路介导损伤后反应性星形胶质细胞获得干细胞潜能
来源期刊 天津医药 学科
关键词 星形细胞 基因 反应性星形胶质细胞 Shh SAG 环巴胺 神经干细胞
年,卷(期) 2019,(7) 所属期刊栏目 细胞与分子生物学
研究方向 页码范围 678-682,封2
页数 6页 分类号 R349.6
字数 语种 中文
DOI 10.11958/20181966
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李晓红 中国人民武装警察部队特色医学中心天津市神经创伤修复重点实验室 23 95 6.0 9.0
2 涂悦 中国人民武装警察部队特色医学中心天津市神经创伤修复重点实验室 12 23 3.0 4.0
3 许子宁 天津中医药大学研究生院 2 0 0.0 0.0
7 叶益超 中国人民武装警察部队特色医学中心天津市神经创伤修复重点实验室 2 0 0.0 0.0
8 刘晓银 中国人民武装警察部队特色医学中心天津市神经创伤修复重点实验室 2 0 0.0 0.0
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星形细胞
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反应性星形胶质细胞
Shh
SAG
环巴胺
神经干细胞
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天津医药
月刊
0253-9896
12-1116/R
大16开
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1959-01-01
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