DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析

• 作者: 卜歆 岳振生 张淑雅 李金奎 王娜 王婷婷 苏金 邱意开
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝纤维化 胶原盘状结构域受体2 血管内皮细胞 基因敲除技术 Cre/LoxP
• 年，卷（期）: 2019,（21）
• 所属期刊栏目: 基础研究·论著
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: R394.3
• 字数: 4207字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2019.21.001

摘要

目的 应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i?EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝脏中的表型.方法 复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚合酶链反应(PCR)+脱氧核糖核酸(DNA)印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠.将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0代杂合小鼠自交筛选获得F1代DDR2flox/flox小鼠,该小鼠与Cdh5-Cre/ERT2小鼠杂交,通过子代自交获得DDR2在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2)小鼠.他莫昔芬诱导血管内皮细胞上DDR2基因敲除,对小鼠进行表型分析.结果 获得DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠DDR2i?EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),DDR2i?EC小鼠出生时符合孟德尔遗传定律,发育良好,他莫昔芬诱导敲除小鼠血管内皮细胞DDR2基因表达后,小鼠出现自发性肝纤维化及黄体血管新生障碍等表型.结论 成功复制DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型.血管内皮细胞DDR2缺失能导致自发性肝纤维化.