多重PCR同时检测食品中4种细菌与常见霉菌

• 作者: 乔晓玲 戚彪 李家鹏 李金春 熊苏玥 王守伟 米瑞芳 陈曦
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 多重聚合酶链式反应 食源性致病菌 霉菌 快速检测
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 305-311
• 页数: 7页
• 分类号: TS207.4
• 字数: 5359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20180521-283

摘要

建立一种同时检测食品中金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌0157:H7以及霉菌的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法.根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuC)、沙门氏菌的侵袭正调节蛋白基因(hilA)、大肠杆菌0157∶H7鞭毛基因flic)、单核细胞增生李斯特氏菌的毒力调控蛋白基因(prfA)及霉菌18S rRNA基因V5区分别设计5对特异性引物,并对PCR扩增反应体系和扩增条件进行优化,确定获得特异性良好的PCR扩增产物.而后在37℃对人工污染致病菌的香肠、面包和豆腐进行增菌培养,5种致病微生物在20 h内的检出限均可达到100 CFU/25 g.本实验建立的多重PCR检测方法适用于食品中4种细菌与常见霉菌的同时检测,相较于传统检测方法,具有快速、简便、特异性高的优点.