海马神经细胞特异性DRD2基因条件性敲除小鼠模型的建立与鉴定

• 作者: 张东冬 张洁元 段朝霞 王建民 陈魁君
• 来源期刊: 解放军医药杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DRD2 小鼠,基因敲除 精神病
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R-332|R74
• 字数: 3531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-140X.2019.04.001

摘要

目的 拟构建DRD2基因大脑海马组织特异性敲除小鼠模型,旨在进一步深入研究DRD2的生物学功能.方法 运用逆转录病毒基因标记技术,结合Cre-loxP重组酶系统,设计和构建打靶载体,然后将打靶载体电转至小鼠胚胎细胞,用PCR和Southern blot验证ES克隆的正确性,最后将筛选出的ES显微注射到胚囊内,经过PCR鉴定得到Neo delete杂合子小鼠(flox/+).将Neo delete杂合子小鼠(flox/+)自交获得Neo delete纯合子小鼠(flox/flox)小鼠,经PCR筛选出的在DRD2 flox/flox纯合子小鼠与海马组织特异性表达Cre基因的CaMKⅡα-Cre工具鼠杂交,获得了DRD2 flox/flox的特异性组织条件性敲除小鼠,并用定量PCR和Western blot法对其进行鉴定.利用PCR和Western blot方法检测成年DRD2条件性敲除小鼠大脑不同部位(前额、海马)的DRD2表达情况.结果 经过多层筛选、鉴定,最后得到DRD2 flox/flox的特异性组织条件性敲除小鼠.所制备的DRD2条件性敲除小鼠基因缺失主要发生在海马组织中,前额组织中表达水平变化不大.DRD2表达水平在不同小鼠的海马组织中降低.DRD2海马组织特异性敲除小鼠在交配饲养过程中纯合子小鼠未出现胚胎致死现象,也未发现其他器官组织结构的异常改变.结论 成功建立大脑海马神经细胞特异性DRD2基因敲除模型,为进一步深入研究DRD2的生物学功能,尤其是DRD2在精神类疾病的发生、发展中的作用机制提供了研究基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张东冬	陆军军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室	2	0	0.0	0.0
2	陈魁君	陆军军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室	2	0	0.0	0.0
3	王建民	陆军军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室	3	0	0.0	0.0
4	张洁元	陆军军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室	2	0	0.0	0.0
5	段朝霞	陆军军医大学大坪医院野战外科研究所第六研究室	1	0	0.0	0.0