猪Mx1基因及分段基因真核表达载体的构建和鉴定

• 作者: 刘新利 吴香菊 孙吉谦 崔云前 杜以军 田云飞 胡悦 齐静
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: Mx1基因 真核表达 抗病毒蛋白 蛋白分段 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 65-69
• 页数: 5页
• 分类号: S852
• 字数: 3427字
• 语种: 中文

摘要

试验旨在通过对猪Mx1基因及其分段基因的真核表达载体的构建和鉴定,为进一步研究Mx1基因的功能奠定基础.试验以猪Mx1的基因序列为基础,以真核表达质粒pXJ41为载体,依据Mx1的蛋白结构进行分段,添加了Flag标签,构建了Mx1及Mx1分段基因的真核表达质粒,分别命名为pXJ41-Flag-Mx1、pXJ41-Flag-G、pXJ41-Flag-GMD、pXJ41-Flag-MDL4、pXJ41-Flag-GED.然后通过免疫印迹试验检测上述质粒在HEK-293T细胞中的表达情况,通过间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白在细胞内的定位情况.免疫印迹试验成功检测到了Mx1及Mx1分段基因的蛋白条带,间接免疫荧光试验检测到各目的蛋白定位于细胞质.上述真核表达质粒可在HEK-293T细胞中成功表达,Mx1及其分段真核表达质粒的构建和成功表达及定位对进一步探索Mx1的功能及机制奠定了基础.