丁香假单孢菌重组褐藻胶裂解酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性

• 作者: 倪辉 吴丽云 朱艳冰 李鹤宾 肖安风 银小倩
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 丁香假单孢菌 褐藻胶裂解酶 酶学性质 抗氧化活性
• 年，卷（期）: 2019,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 38-45
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.11.005

摘要

目的:将丁香假单孢菌的褐藻胶裂解酶进行克隆表达和纯化,研究重组酶的酶学性质及酶解产物的抗氧化活性,为进一步研究该酶的结构与功能奠定良好的基础.方法:利用PCR扩增褐藻胶裂解酶基因,将它克隆至表达载体pET-28a;表达产物用亲和层析纯化,研究重组酶的酶学性质;通过测定酶解产物的还原能力和清除ABTS·+和·OH自由基的能力,分析酶解产物的抗氧化活性.结果:来自丁香假单孢菌的重组褐藻胶裂解酶的分子质量为40.8 ku.该重组酶专一性降解聚甘露糖醛酸,酶的最适反应温度和pH分别为30℃和7.5,温度低于50℃时稳定.除了SDS和DTT,重组酶对其它抑制剂和去垢剂具有较好的抗性.酶解产物对ABTS·+和·OH自由基的半数抑制剂量IC50分别为1.56 mg/mL和0.56 mg/mL,还原能力较强.结论:该重组褐藻胶裂解酶的酶解产物有一定的抗氧化活性,具有应用潜力.