三七转录因子PnWRKY1对三七皂苷生物合成的影响

• 作者: 于怡琳 刘迪秋 姜利 姜森 曲媛 葛锋
• 来源期刊: 西北植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人参属 转录因子 过表达 三萜皂苷
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 430-438
• 页数: 9页
• 分类号: Q785|Q786|Q789
• 字数: 6020字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1000-4025.2019.03.0430

摘要

该研究以野生型三七为材料,采用同源克隆的方法,获得三七转录因子PnWRKY1基因,运用农杆菌转化法构建转基因细胞系,通过测定转基因细胞系中的总皂苷含量以及重要单体皂苷的含量,并采用qRT-PCR分析皂苷合成途径中相关基因的表达情况,为三七皂苷生物合成高效调控策略的建立提供理论依据.结果显示:(1)转录因子PnWRKY1长度为810 bp,编码269个氨基酸.(2)成功构建PnWRKY1过表达载体pCAMBIA2300s-PnWRKY1,经农杆菌转化获得了6株具有卡那霉素抗性的转基因细胞系(T1～T6),对卡那霉素基因nptⅡ进行PCR检测表明,所有细胞系均有与预期大小一致的450 bp特异性条带,说明成功获得了6株PnWRKY1过表达转基因细胞系.(3)6株转基因细胞系中的PnWRKY1表达水平均极显著高于野生型细胞系,其中表达量最高的T3细胞系比野生型增加了5.36倍.(4)过表达PnWRKY1基因细胞系的总皂苷生物合成均得到显著提高,其中T1～T6中总皂苷含量分别为野生型细胞系的2.46、1.98、2.67、1.74、2.54和1.98倍;6株过表达PnWRKY1细胞系中的4种单体皂苷R1、Rg1、Re、Rb1的含量与野生型细胞系相比均有不同程度的提高,且T3细胞系中的单体皂苷Re含量最高(37.81 mg/g).(5)与野生型细胞系(WT)相比,过表达PnWRKY1细胞系中三七皂苷合成途径中的关键酶基因PnDS、PnSS和PnSE的最高表达水平分别增加3.1、4.0和4.5倍.研究表明,转录因子PnWRKY1在三七细胞中的过表达可能参与调节皂苷生物合成部分重要酶基因的表达,且Pn WRK Y1可能通过调控三七皂苷生物合成途径中关键酶基因的表达间接影响三七皂苷的合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘迪秋	昆明理工大学生命科学与技术学院	59	489	13.0	19.0
2	葛锋	昆明理工大学生命科学与技术学院	64	462	14.0	19.0
3	曲媛	昆明理工大学生命科学与技术学院	13	87	4.0	9.0
4	姜森	昆明理工大学生命科学与技术学院	4	6	1.0	2.0
5	于怡琳	昆明理工大学生命科学与技术学院	3	2	1.0	1.0
6	姜利	昆明理工大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0