山羊睾丸支持细胞分离培养及其氧化应激效果研究

• 作者: 刘丹丹 刘琦 周杰 王佳明 王菊花 董静 薛秀恒
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 支持细胞 分离和培养 氧化应激
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 页码范围: 99-106
• 页数: 8页
• 分类号: S814.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2019.02.11

摘要

为探究在体外培养过程中山羊睾丸支持细胞(GSCs)存在的氧化应激问题,采用2步酶消化法分离和纯化GSCs,通过形态学观察、MTT法、油红染色和流式细胞鉴定细胞活度和纯度,再用不同浓度的H2 O2处理GSCs,研究GSCs的活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性及其DNA指数(DI)的变化.结果表明:GSCs形态为多角形状;在培养至第5天时GSCs活性最强;油红O染色鉴定多数细胞胞质含有红色的脂滴;GATA4阳性细胞率达到88.27±3.29％;添加50 μmol/L H2O2组细胞存活率与对照组相比差异不显著(P＞0.05),其它各组均显著低于对照组(P＜0.05);添加50 μmol/L H2O2组MDA含量和SOD的活性均与对照组无显著性差异(P＞0.05),而其他各组均与对照组有显著差异(P＜0.05);细胞DNA倍体检测发现添加50 μmol/L H2O2时,细胞DI为1.08±0.01,未出现异倍体;其他各组细胞DI分别为1.15±0.02、1.20±0.03、1.26±0.03和1.32±0.01,均有异倍体产生.本研究分离纯化了GSCs,并进行培养和鉴定,200 μmol/L H2O2处理GSCs后,SOD活性显著降低,MDA含量显著增加,出现明显的异倍体,200 μmol/L H2O2是建立GSC氧化应激模型的适宜浓度,以此为后期建立GSC氧化应激模型提供研究基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王菊花	安徽农业大学动物科技学院	66	239	10.0	12.0
2	薛秀恒	安徽农业大学茶与食品科技学院	81	349	10.0	15.0
3	周杰	安徽农业大学动物科技学院	84	339	10.0	14.0
4	王佳明	安徽农业大学动物科技学院	6	6	2.0	2.0
5	刘丹丹	安徽农业大学动物科技学院	5	1	1.0	1.0
6	董静	安徽农业大学动物科技学院	4	1	1.0	1.0
7	刘琦	安徽农业大学动物科技学院	4	1	1.0	1.0