芒果无机焦磷酸酶基因的克隆及其表达载体构建

• 作者: 王佳 白蓓蓓 荆永琳 蓝丽 蔡秉宇 赵志常
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 芒果 PPase 基因克隆 表达载体构建
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 308-313
• 页数: 6页
• 分类号: S667.7|Q78
• 字数: 3874字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2019.02.014

摘要

无机焦磷酸酶(inorganic pyrophosphatase,PPase)催化焦磷酸(PPi)水解为2个无机正磷酸(Pi),是蔗糖合成途径中的调控关键节点之一.本研究根据已经报道的PPase基因的序列设计兼并引物,采用3′RACE和5′RACE方法,从贵妃芒果的果实中克隆得到了一个芒果PPase基因,将其命名为MiPPase,其全长cDNA序列为1014bp,开放阅读框为837bp,编码278个氨基酸,分子量为30.85 ku,等电点为4.68.通过系统发育分析发现该基因编码的蛋白与红花烟草具有较近的亲缘关系.为深入探究MiPPase基因在蔗糖代谢过程中的作用,本研究成功构建出pGreenII 62-SK-MiPPase基因过量表达载体,为后续研究MiPPase基因在芒果果实蔗糖合成的作用机理提供理论依据.