基于RNAscope(R)原位杂交技术对PRRSV感染组织样本的检测分析

• 作者: 何希君 刘强 张卓 张永莉 胡守萍 马泽林
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: RNAscope(R) 原位杂交 免疫组织化学 细胞凋亡 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 40-45
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201804021

摘要

为扩大RNAscope(R) 原位杂交技术(RNAscope(R) ISH)在猪繁殖与呼吸综合征病-毒(PRRSV)基础研究中的应用范围,本研究将该技术与免疫组织化学技术(IHC)相结合,通过条件优化建立了RNAscope(R)ISH-IHC双重染色技术.经检测不同病毒感染的组织切片中的PRRSV表明该技术具有良好的特异性.采用该双重染色技术检测PRRSV感染的猪淋巴结组织切片中巨噬细胞感染PRRSV情况,结果显示PRRSV核酸主要存在于巨噬细胞胞浆中,在胞核中也有分布,但在一些非巨噬细胞中也散在PRRSV阳性信号,表明PRRSV不仅在猪淋巴结巨噬细胞中复制.利用该双重染色技术检测PRRSV感染后不同时间点猪胸腺组织切片中凋亡相关调节基因Bid、Bcl-xl表达水平,结果显示一段时间内Bid基因转录水平上调、Bcl-xl基因转录水平下调,与同条件下荧光定量PCR结果一致.综上,本研究建立的RNAscope(R) ISH-IHC双重染色技术结合了RNAscope(R) ISH与IHC各自的优势,不仅能够检测病毒感染后在组织中的定位,还可以分析病毒感染后宿主内源性基因转录的变化趋势,实现了在同一组织切片中对核酸与蛋白的双重检测.经验证该检测方法适用于PRRSV实验室研究,为PRRSV的相关基础研究提供新的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张卓	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	9	26	3.0	4.0
2	刘强	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	19	153	6.0	12.0
3	胡守萍	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	18	121	7.0	10.0
4	马泽林	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	张永莉	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	1	0	0.0	0.0