鸡柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法的建立

• 作者: 唐欢 宋军科 张会军 范现成 赵光辉 马峋
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 柔嫩艾美耳球虫 巨型艾美耳球虫 双重PCR
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: S852.723|S854.43
• 字数: 4397字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2019.02.003

摘要

为了建立一种能够快速实现对鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和巨型艾美耳球虫(E.maxima)同时进行检测的双重PCR方法,基于2种艾美耳球虫各自的ITS-1基因筛选2对特异性引物,对制备的阳性DNA样品进行PCR扩增,凝胶电泳检测结果显示,分别在约450 bp和150 bp处出现目的条带.对PCR反应中的退火温度、MgCl2浓度、DNA模板量等进行优化.结果 表明,当退火温度为59℃、MgCl2浓度为2.5 mmol/L、DNA模板量为2μL时,双重PCR扩增结果最佳.特异性检测结果显示,所建立的双重PCR对环形泰勒虫、羊巴贝斯虫、隐孢子虫和蓝氏贾第虫的扩增结果均呈阴性,表明建立的方法具有较高的特异性.成功建立了柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法,为临床中鸡球虫病的快速诊断提供了一种可靠的检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋军科	西北农林科技大学动物医学院	35	92	5.0	8.0
2	赵光辉	西北农林科技大学动物医学院	26	43	4.0	5.0
3	张会军	西北农林科技大学动物医学院	7	7	2.0	2.0
4	范现成	西北农林科技大学动物医学院	5	10	3.0	3.0
5	马峋	西北农林科技大学动物医学院	2	0	0.0	0.0
6	唐欢	西北农林科技大学动物医学院	1	0	0.0	0.0