聚合物接枝脂肪酶的合成及其对酶活的影响

• 作者: 刘宗浩 史清洪 姜紫耀 白姝
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 生物催化 皱褶假丝酵母脂肪酶 原子转移自由基聚合 聚合物 疏水性 脂肪酶活 稳定性
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 3473-3482
• 页数: 10页
• 分类号: TQ925.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.11949/0438-1157.20190254

摘要

利用原子转移自由基聚合方法将含C2～C4烷基链的单体化合物分别接枝到皱褶假丝酵母脂肪酶(CRL)表面合成了HEMA-g-CRL、GMA-g-CRL、nPMA-g-CRL和BMA-g-CRL四种聚合物接枝CRL.CD和荧光光谱学分析显示,聚合物接枝导致HEMA-g-CRL、nPMA-g-CRL和BMA-g-CRL分子的α-螺旋和β-折叠含量增加.与此同时,聚合物接枝CRL分子荧光发射光谱也发生了蓝移,意味着其具有更加紧密的分子构象.酶活测定结果进一步显示,聚合物接枝增强CRL酶活227%～278%.随着单体化合物烷基链长增加,聚合物接枝CRL的Km值由0.17 mmol·L-1降至0.09 mmol·L-1.与此同时,聚合物接枝CRL的kcat值则提高至106～182 s-1.BMA-g-CRL的催化效率达到了野生型CRL的3.28倍.这反映出聚合物接枝助力了CRL"盖子"结构开启和CRL活性中心暴露,促进底物的转化.稳定性测试表明,聚合物接枝提升了CRL的热稳定性并拓宽了其pH操作范围.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	史清洪	天津大学化工学院	23	117	5.0	10.0
3	白姝	天津大学化工学院	35	339	10.0	17.0
6	刘宗浩	天津大学化工学院	3	6	2.0	2.0
7	姜紫耀	天津大学化工学院	1	0	0.0	0.0