摘要:
目的 探讨PRP(富血小板血浆)、PRF(富血小板纤维蛋白)联合脂肪来源干细胞(ADSC)治疗慢性皮肤溃疡的效果,为其临床应用提供实验依据.方法 选择健康6~8周龄SD大鼠24只,各取腹股沟脂肪组织5g,胶原酶消化后,经免疫细胞化学法和流式细胞仪法鉴定为脂肪来源间充质干细胞(ADSC);继续培养,取生长状态良好的第3代ADSCs移植备用.抽取同一只大鼠的全血10ml,用于制备PRP和PRF备用.大鼠麻醉后于其背部脊柱两侧制作6个1.5cm×1.5cm大小的全层皮肤缺损创面,并随机分为A、B、C、D、E、F六个组.A组创面注射PRF联合ADSC治疗,B组创面注射PRF治疗,C组创面注射ADSC治疗,D组创面注射ADSC联合PRP治疗,E组创面注射PRP治疗,F组创面注射等量生理盐水(NS)治疗.治疗后7、14、21、28天溃疡创面取活检行组织病理学检查和观察溃疡愈合的速度和质量以及比较各自的表皮、真皮、成纤维细胞、血管及皮肤附属结构的再生情况.结果 各组大鼠创面愈合效果良好,未出现感染等症状.7天时已无明显炎性细胞,伤口被结缔组织增生形成的肉芽组织填满,其内可见新生毛细血管,成纤维细胞等修复细胞;表皮层出现并增厚,逐渐向创口处迁移,再上皮化增生活跃.14天时再上皮化阶段完成,肉芽组织被表皮覆盖,并逐渐纤维化,胶原纤维等含量显著增加,可见新生的毛囊、皮脂腺、汗腺、角质层等附属结构.21天时皮肤创面基本愈合,各组愈合速度无明显差异,同时毛囊、皮脂腺、汗腺、角质层等附属结构增多,肉芽组织逐渐向瘢痕组织转化,并进入组织重塑期.28天与21天比较无明显变化,组织进入漫长重塑期.愈合状况:D组(ADSC+PRP组)、A组(ADSC+PRF组)和C组(ADSC组)表皮较完整,血管新生明显增多,以D组最明显,A、C、E、B组依次随后,F组表皮迁移速度最慢,血管相对较少.新生毛囊增多方面,以D组最明显,A、C、E、B组依次随后,F组最少.各组愈合速度与质量大致为D组>A组>C组>E组>B组>F组.结论 综合大体观察及病理结果,SD大鼠背部皮肤溃疡愈合速度与质量大致为ADSC+PRP>ADSC+PRF>ADSC>PRP>PRF>NS,提示PRP、PRF联合ADSC在皮肤溃疡治疗中有明显提高组织愈合质量的作用.