摘要:
目的 观察和痹方剂对人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)炎症因子分泌的影响,并探讨其机制.方法 取FLS,并随机分为6组.激动剂组每孔加含10% PNU-282987药物血清的DMEM培养液,MTX组加含10%甲氨蝶呤(MTX)药物血清的DMEM培养液,低剂量组加含10%低剂量和痹方剂药物血清的DMEM培养液,中剂量组加含10%中剂量和痹方剂药物血清的DMEM培养液,高剂量组加含10%高剂量和痹方剂药物血清的DMEM培养液,模型组加10% DMEM血清的培养液.24 h后取细胞上清液及滑膜细胞.采用ELISA法检测细胞上清液IL-17、高迁移率组蛋白1(HMGB1),Western blotting法检测细胞α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)、核转录因子-κB亚基p65(NF-κB p65),RT-PCR法检测细胞α7nAchR mRNA.结果 与模型组比较,激动剂组、MTX组、中剂量组IL-17、HMGB1表达降低(P均<0.05);与激动剂组比较,MTX组、低剂量组、中剂量组、高剂量组IL-17表达及高剂量组HMGB1表达升高(P均<0.05);与MTX组比较,中剂量组IL-17表达降低(P均<0.05).与模型组比较,α7nAChR蛋白、mRNA表达升高,p65蛋白表达降低(P均<0.05);与激动剂组比较,低剂量组p65蛋白及中剂量组α7nAChR蛋白、p65蛋白表达升高,低剂量组、高剂量组 α7nAChR蛋白及低剂量组、中剂量组、高剂量组α7nAChR mRNA表达降低(P均<0.05);与MTX组比较,低剂量组p65蛋白及中剂量组α7nAChR蛋白、NF-kBp65蛋白、α7nAChR mRNA表达升高(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组α7nAChR蛋白、mRNA表达升高,中剂量组p65蛋白及高剂量组α7nAChR蛋白、p65蛋白表达降低(P均<0.05);与中剂量组比较,高剂量组α7nAChR、NF-kBp65蛋白表达降低(P均<0.05).结论 中等浓度和痹方剂能抑制RA FLS分泌炎症因子,进而起到治疗作用,机制可能为上调α7nAChR mRNA、蛋白表达,激活CAP,进而调节NF-kB信号通路.