耐酸与酸敏酒酒球菌环丙烷脂肪酸合酶基因的差异

• 作者: 何玲 刘树文 田雨 陈其玲
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 酒酒球菌 耐酸性 环丙烷脂肪酸基因 外源表达
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 64-71
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2019.07.009

摘要

目的:研究筛选得到的野生耐酸与酸敏酒酒球菌环丙烷脂肪酸基因(cfa)的差异,探索酒酒球菌环丙烷脂肪酸基因与酒酒球菌耐酸性的相关性.方法:35株野生酒酒球菌中,利用酸胁迫环境筛选耐酸能力最强的菌株,并与野生酸敏菌SX-1b及实验室离子注入诱变的耐酸、酸敏突变菌a3、b2共同进行环丙烷脂肪酸基因cfa的克隆、 测序和比对;选择存在氨基酸突变的野生耐酸酒酒球菌及野生酸敏菌株的cfa基因在植物乳杆菌ATCC33222中进行外源表达,从而验证耐酸菌株cfa基因与耐酸能力的相关性.结果:(1)筛选出野生型耐酸酒酒球菌CS-7b和ME-5b,确定其耐酸生长极限为pH 2.6;(2)对野生菌与诱变菌的cfa基因进行测序比对发现,耐酸菌株的野生型和诱变型的序列相同,较酒酒球菌PSU-1发生3处碱基突变,而酸敏菌野生型、诱变型的序列则与酒酒球菌PSU-1一致;(3)将SX-1b与CS-7b的cfa基因在植物乳杆菌中表达,构建重组载体pMG36e-cfa1和pMG36e-cfa2,并得到对应重组菌L1和L2;(4)在pH 3.6培养基中培养,重组菌L1和L2的生长情况明显优于含空载体的植物乳杆菌L0,且L2的生长优于L1.而在pH 3.4培养基中培养,L0没有生长迹象,只有重组菌L1和L2正常生长,cfa基因的导入突破了植物乳杆菌宿主菌的生长极限.结论:酒酒球菌cfa基因及基因间存在的稳定差异与菌株耐酸表型具有一定相关性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何玲	西北农林科技大学园艺学院	67	559	13.0	20.0
2	陈其玲	西北农林科技大学葡萄酒学院	5	16	3.0	4.0
3	田雨	西北农林科技大学葡萄酒学院	4	7	1.0	2.0