改进后的验证SREBP-1c下游调控基因的染色质免疫共沉淀方法

• 作者: 宋辉 李岩 李建宁 李旺 李雨涵 杨怡 杨玲玲 祁慧
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 染色质共沉淀 DNA 蛋白质 PCR
• 年，卷（期）: 2019,（17）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2439-2443
• 页数: 5页
• 分类号: Q-33|Q243
• 字数: 3588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13820/j.cnki.gdyx.20191161

摘要

目的 以SREBP-1c下游调控基因为例,对HEK 293T细胞进行染色质免疫共沉淀(chromatin co-immunoprecipitation,CHIP)实验改进,获得更好实验结果.方法 对常规CHIP改进方法包括细胞洗涤时添加蛋白酶抑制剂PMSF、免疫沉淀复合物采用3步洗涤法、解交联采用蛋白酶K 56℃水浴10 min、样品DNA采用基因组提取试剂盒回收.结果 与常规CHIP相比,改进后的CHIP获得纯度更高的样品DNA.结论 改进后方法更适用于细胞染色质免疫共沉淀,使细胞中基因表达调控研究中DNA提取与鉴定更高效.