上转发光免疫层析技术快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体方法的建立

• 作者: 刘明远 刘晓雷 唐斌 张平平 李仕存 王学林 王春 白雪 赵勇
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 上转发光技术 免疫层析 旋毛虫 即时检测 食品安全
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 931-935
• 页数: 5页
• 分类号: S852.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.05.21

摘要

基于上转发光免疫层析(UPT-LF)技术,旨在建立UPT-LF快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法.采用间接法制备UPT-LF试纸条,通过共价偶联使二抗山羊抗猪IgG和上转发光纳米颗粒(UCP)结合,并加入样品垫和被检血清结合,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因(WM5)表达的蛋白WM5为猪抗旋毛虫IgG特异性结合抗原,WM5(2 g/L)与兔抗山羊IgG(0.5 g/L)喷点于分析膜上作为UPT-LF试纸条检测带(T)与质控带(C),该试纸条命名为Tsp-UPT-LF.Tsp-UPT-LF通过对95份阴性血清检测,确定Tsp-UPT-LF的Cutoff值为0.099.Tsp-UPT-LF和ELISA分别对273份旋毛虫感染猪血清样本进行检测,总符合率为92.31％,一致性系数Kappa(K)值为0.837,表明两种方法具有高度一致性.Tsp-UPT-LF检测旋毛虫、猪囊虫、华支睾吸虫感染的猪血清Tsp-UPT-LF呈现对旋毛虫良好的特异性.Tsp-UPT-LF检测感染50 000条旋毛虫肌幼虫28 d猪血清为阳性,T/C值0.109,122 d阳性最强,T/C值为0.207,至425 d时阳性值有所下降,抗旋毛虫IgG阳性率为71.4％.本研究建立了基于UPT-LF技术快速检测猪抗旋毛虫IgG抗体的方法,为猪旋毛虫即时感染检测、确保食品安全提供了一种可参考的检测方法.