鼠伤寒沙门氏菌PCR快速检测试剂盒的研制

• 作者: 侯宛宛 刘斌 岳田利 张艺沛 方莹 李可 柳雅馨 陈晴
• 来源期刊: 食品科技
• 学科: 工学
• 关键词: 鼠伤寒沙门氏菌 聚合酶链式反应(PCR) 检测试剂盒
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测篇
• 页码范围: 359-366
• 页数: 8页
• 分类号: TS207.4
• 语种: 中文

摘要

为了能快速、准确、灵敏地检测鼠伤寒沙门氏菌,而研制一种基于PCR技术的检测试剂盒.该试剂盒采用了一对特异引物,该引物是以鼠伤寒沙门氏菌的基因STM4495中一段特异序列为检测靶点设计的,可使试剂盒具有良好的特异性.特异性评价试验结果显示,可从22株沙门氏菌(12种血清型)和20株非沙门氏菌(12个常见属)中,准确地检测出鼠伤寒沙门氏菌.此外,从5种PCR增强剂中筛选到了3种,并添加到试剂盒中,以避免PCR反应受到引物二聚体和食品中PCR抑制剂的干扰,使试剂盒具备良好的灵敏性.经评价试验表明,试剂盒检测鼠伤寒沙门氏菌的检测限可以达到37.5 fg/PCR,即使贮存于-20℃放置30 d,仍然能够达到原有检测限;而将该试剂盒反复冻融60次后,也可达375 fg/PCR.对食品样品进行检测,经过增菌24 h后,可以从O～1 CFU/10 g乳粉中检测出鼠伤寒沙门氏菌.从以上结果可知,研制的PCR试剂盒能够准确地检测出鼠伤寒沙门氏菌,具有较高的灵敏性和稳定性,可以用于食品中鼠伤寒沙门氏菌的快速筛检.