调控Hippo信号通路促进间充质干细胞修复急性呼吸窘迫综合征肺损伤

• 作者: 惠姣洁 李朗 董亮 陈意喆
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: Hippo信号通路 间充质干细胞 肺泡Ⅱ型上皮细胞 急性呼吸窘迫综合征 肺损伤修复
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 855-862
• 页数: 8页
• 字数: 5657字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2019.07.011

摘要

目的 探讨通过调控Hippo信号通路促进间充质干细胞(MSC)修复脂多糖(LPS)诱导急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺损伤的作用.方法 通过慢病毒载体转染构建低表达大肿瘤抑制因子1(LATS1)基因的C57BL/6小鼠骨髓来源的MSC(mMSCs)细胞系,气道内给予2 mg/mLLPS 50μL复制小鼠ARDS模型,SPF级C57BL/6雄性小鼠随机(随机数字法)分为4组(n=36):正常对照组、ARDS组、ARDS+空干扰病毒转染的mMSCs (MSC-shcontrol)治疗组、ARDS+转染干扰LATS1病毒的mMSCs(MSC-shLATS1)治疗组.成模后3、7、14d后处死小鼠并收集肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)样本.近红外荧光成像、免疫荧光染色及Western blot评估mMSCs在肺组织的存留及向肺泡Ⅱ型肺泡上皮(ATⅡ)细胞的分化;测定肺组织湿质量/体质量比(LWW/BW)、BALF中总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)水平及评价mMSCs对肺水肿的改善效应;Westernblot检测上皮紧密连接蛋白Occludin反映mMSCs对肺泡上皮通透性影响;ELISA检测BALF中IL-1β3、IL-6及IL-10含量评估mMSCs对肺组织炎症反应的影响;肺组织行HE染色及肺损伤评分评估mMSCs对肺损伤的修复作用;肺组织行Masson染色及肺纤维化评分评估mMSCs对肺纤维化的影响.结果 MSC-shLATS1治疗组3、7、14 d mMSCs在ARDS肺组织内存留数量(个/HP)[(26.25±4.58)、(20.49±3.86)、(13.77±3.55)]均较MSC-shcontrol治疗组[(12.13±3.75)、(9.97±2.76)、(6.89±2.10)]更多(均P＜0.05),14d向ATⅡ细胞的分化比例[(64.12±15.29)％]也较MSC-shcontrol治疗组[(19.64±3.71)％]更高(P＜0.05);MSC-shLATS1治疗组3d及14 d LWW/BW、BALF中TP和ALB水平[(9.85±1.51)及(6.11±0.83)mg/g、(5.12±0.87)及(3.05±0.87)(mg/mL)、(0.44±0.18)及(0.33±0.04) mg/mL]均较MSC-shcontrol治疗组[(14.88±1.74)及(8.04±1.70)mg/g、(8.08±1.72)及(5.94±1.20) (mg/mL)、(0.71±0.21)及(1.07±0.29) (mg/mL)]下降(均P＜0.05),其14 d Occludin蛋白相对表达[(0.79±0.11)]较MSC-shcontrol治疗组[(0.49±0.19)]升高(P＜0.05);MSC-shLATS1治疗组BALF中IL-1 β、IL-6浓度[(60.11±8.58)、(101.74±11.55)(pg/mL)]较MSC-shcontrol治疗组[(99.26±14.32)、(145.54±13.29)(pg/mL)]更低(均P＜0.05),但IL-10浓度[(316.65±37.88)(pg/mL)]较MSC-shcontrol治疗组[(190.83±22.61)(pg/mL)]更高(P＜0.05);MSC-shLATS1治疗组3d、14d肺损伤评分及14d肺纤维化评分[(7.18±1.12)、(3.33±0.49)及(0.68±0.12)]均较MSC-shcontrol治疗组[(9.72±1.45)、(5.11±0.86)及(1.47±0.18)]降低(均P＜0.05).结论 通过低表达LATS1基因抑制Hippo信号通路能促进mMSCs对ARDS肺损伤的修复效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	惠姣洁	南京医科大学附属无锡人民医院重症医学科	11	23	4.0	4.0
2	陈意喆	南京医科大学附属无锡人民医院重症医学科	4	9	2.0	3.0