基于Cyt b基因的PCR技术对牛鞭药材的鉴定方法研究

• 作者: 孙丽媛 徐岩 李明成 段思琪 翟英南 高丽君
• 来源期刊: 中国药房
• 学科: 医学
• 关键词: 牛鞭 鉴定 Cytb基因 PCR DNA指纹
• 年，卷（期）: 2019,（24）
• 所属期刊栏目: 中药与民族药
• 页码范围: 3408-3412
• 页数: 5页
• 分类号: R927|R932
• 字数: 5148字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.24.17

摘要

目的:建立对牛鞭药材的聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法,从分子水平上对牛鞭药材的真伪进行鉴定.方法:提取牛鞭及其伪品(驴鞭、猪鞭、羊鞭)的基因组DNA,并对其完整性、纯度和浓度进行检测.利用GenBank相关信息,以牛鞭的线粒体细胞色素b基因(Cyt b)为靶基因,应用Primer-BLAST在线软件设计特异性引物,并对不同物种鞭类样品进行PCR扩增,对产物进行电泳分析;对获得的牛鞭样本PCR产物进行克隆和DNA测序验证.对所建立的PCR鉴定方法进行特异性和重复性考察验证.结果:提取所得的牛鞭及其伪品DNA的纯度较高,无蛋白质或RNA污染;1.5％琼脂糖凝胶电泳结果显示,牛鞭样本在200～300 bp之间均出现明显的目的基因条带,而其他伪品未见相应条带出现.DNA测序结果证实,所获牛鞭样本基因片段的核苷酸序列与GeneBank中牛鞭物种相似性均为100％.方法学验证结果显示所建方法特异性、重复性均良好.结论:本研究所建基于Cyt b基因的PCR鉴定方法简单、快速,准确性、特异性、重复性均良好,可满足牛鞭及其伪品的分析鉴定需求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙丽媛	北华大学医学技术学院	31	116	5.0	10.0
2	高丽君	北华大学医学技术学院	24	57	4.0	6.0
3	徐岩	北华大学医学技术学院	17	62	5.0	7.0
4	段思琪	北华大学医学技术学院	4	4	1.0	2.0
5	翟英南	北华大学医学技术学院	1	0	0.0	0.0