复合杂合性F11基因突变导致的遗传性凝血因子Ⅺ缺陷症家系分析

• 作者: 刘媚娜 周星星 李小龙 杨丽红 潘景业 王明山 苏看看 金艳慧
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: 凝血因子Ⅺ缺陷症 遗传性 生物信息学 模型分析
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 临床遗传学论著
• 页码范围: 363-367
• 页数: 5页
• 字数: 3558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9406.2019.04.018

摘要

目的 对一个遗传性凝血因子Ⅺ(coagulation factorⅪ,FⅪ)缺陷症患者家系进行表型和基因检测,寻找致病基因并初步探讨其分子致病机制.方法 检测先证者及其家系成员的血浆凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)含量、血浆凝血因子Ⅷ活性(coagulation factorⅧactivity,FⅧ∶C)、凝血因子Ⅸ活性(coagulation factorⅨactivity,FⅨ∶C)、FⅪ活性(FⅪactivity,FⅪ∶C)、凝血因子Ⅻ活性(coagulation factorⅫactivity,FⅫ∶C)和狼疮抗凝物(lupus antieoagulation,LA);ELISA法检测FⅪ抗原(FⅪantigen,FⅪ∶Ag)等指标,明确临床表型诊断.采用DNA直接测序法分析先证者F11基因15个外显子、侧翼序列以及5'端、3'端非翻译区序列,发现突变位点后用反向测序予以证实,并检测家系成员相应的突变位点区域.采用ClustalX-2.1-win软件分析氨基酸突变位点的保守性;用PolyPhen-2、PROVEAN、SIFT和Mutation Taster 4个在线生物信息学软件分析突变对蛋白质功能的影响;用Swiss-PdbViewer软件对突变位点进行蛋白模型和氨基酸相互作用分析.结果 先证者APTT为69.6 s,明显延长,其FⅪ∶C和FⅪ∶Ag均明显下降,分别为6％和10.7％;其母亲、姐姐、大妹、弟弟、女儿和儿子APTT均稍延长,FⅪ∶C和FⅪ∶Ag也均有不同程度下降(为正常对照的50％左右).基因分析发现先证者F11基因第7外显子的c.738G＞A(p.Trp228stop)杂合无义突变及第13外显子的c.1556G＞C(p.Trp501Ser)杂合错义突变;其母亲、姐姐和女儿存在p.Trp228stop突变杂合子,大妹、弟弟和儿子存在p.Trp501Ser突变杂合子;其丈夫和小妹均为野生型.保守性分析结果表明,Trp501在同源物种间高度保守.4个生物信息学软件对该突变的预测结果一致:PolyPhen-2评分结果为1.000分,PROVEAN评分结果为-11.565分,均预示此突变是可能致病性的突变;SIFT评分结果为0.00分,预示此突变可影响蛋白质功能;Mutation Taster评分结果为0.9999分,预示此突变可引起相关疾病.突变蛋白模型分析显示,在野生型FⅪ蛋白质中,非极性疏水的Trp501含有两个苯环,其主链和Gln512的主链形成1个氢键;当突变为极性亲水性的Ser501后,其两个苯环消失,原有的氢键没有改变,但其侧链与His396的苯环增加了1个氢键,导致蛋白质结构改变.结论 该家系F11基因第7外显子c.738G＞A杂合无义突变及第13外显子c.1556G＞C杂合错义突变可能与该家系FⅪ水平减低有关.